Exame de Biologia e Geologia 2025 · Época especial — item II.3, resolvido

O ponto de partida. O item tem duas partes, e os critérios dão um elemento a cada uma: identificar a etapa (A) e justificar (B). A pista está na expressão «a partir da cromatina»: tens de saber de que é feita a cromatina para perceberes o que é preciso remover para ficar com «apenas moléculas de DNA». E repara no adjetivo «principal»: várias etapas contribuem para a extração, mas só uma separa o DNA daquilo a que está ligado.

1.º — o que é a cromatina

A cromatina é o material de que são feitos os cromossomas de uma célula eucariótica: DNA associado a proteínas, as histonas. A molécula de DNA enrola-se à volta de grupos de histonas, formando os nucleossomas, como um fio enrolado em contas. Assim, quando a célula é rompida e a cromatina é libertada, o DNA ainda está preso às histonas. Para obter apenas DNA, é preciso separá-lo dessas proteínas – e a maneira de o fazer é destruir as proteínas.

2.º — (A) a etapa: a adição da solução com proteases

Percorre o protocolo e pergunta, para cada etapa, «qual é o alvo?»:

• macerar → paredes celulares;
• água quente, sal e detergente → membranas (lise) e cargas do DNA;
• filtrar → restos sólidos;
• adicionar ao líquido filtrado uma solução com proteases → proteínas;
• adicionar etanol → precipitar o DNA.

A única etapa cujo alvo são as proteínas é «Adicionar ao líquido filtrado cerca de 25 mL de uma solução com proteases». Escreve-a com clareza – a identificação vale o elemento A.

3.º — (B) a justificação: as proteases degradam as histonas

O texto diz que as proteases são «enzimas hidrolíticas»: catalisam a hidrólise das ligações peptídicas das proteínas, cortando-as em fragmentos. As enzimas são específicas: as proteases atuam sobre proteínas e não sobre o DNA. Ao degradarem as proteínas associadas ao DNA (as histonas), desfazem a cromatina e libertam o DNA. O que fica, e depois precipita com o etanol, são as moléculas de DNA.

A justificação tem de fazer a ligação à cromatina: não chega dizer que «as proteases degradam proteínas» – tens de dizer que proteínas (as que estão associadas ao DNA, as histonas) e porque é que isso importa (é assim que se fica só com DNA).

4.º — uma resposta de nível máximo

«A principal etapa foi a adição de uma solução com proteases ao líquido filtrado. A cromatina é formada por DNA associado a proteínas (histonas), e as proteases, sendo enzimas hidrolíticas, degradam essas proteínas associadas ao DNA, pelo que ficam apenas as moléculas de DNA.»

como este item é corrigido (é por níveis)

• nível 4 – $9$ pontos: os dois elementos, com rigor científico;
• nível 3 – $7$ pontos: os dois elementos, com falhas no rigor científico;
• nível 2 – $5$ pontos: apenas um dos elementos, com rigor científico;
• nível 1 – $3$ pontos: apenas um dos elementos, com falhas no rigor científico.

Consequência prática: identificar a etapa certa sem justificar vale, no máximo, $5$ pontos. E uma justificação sem a etapa identificada também fica pela metade.

onde se perdem pontos

• Escolher o etanol («é o que faz aparecer o DNA»). O etanol separa o DNA da solução aquosa, mas não o separa das proteínas; o item pergunta pela etapa que deixa apenas DNA, a partir da cromatina.
• Escolher o detergente. Rompe as membranas (lípidos); não atua sobre as histonas.
• Escolher a filtração. Remove restos sólidos (paredes, fibras), mas as histonas estão dissolvidas no líquido, ligadas ao DNA, e passam pelo filtro.
• Justificar só com «as proteases destroem proteínas» sem dizer quais: as associadas ao DNA (histonas). É essa ligação à cromatina que o elemento B pede.
• Dizer que as proteases «digerem o DNA». É ao contrário (as enzimas que degradam o DNA são as nucleases), e uma contradição destas anula o elemento.

para reconhecer o próximo item deste tipo

Num protocolo, para saber o que faz cada passo, pergunta qual é o alvo: lípidos → detergente; proteínas → proteases; cargas do DNA → sal; solubilidade → etanol; paredes → maceração. E «cromatina» é sempre DNA + histonas: separar o DNA da cromatina é destruir as histonas. Num item «identifique… justifique», escreve primeiro a identificação, numa frase, e depois a justificação, ligada ao conceito-chave do enunciado.